燙傷感染動(dòng)物模型

一、燙傷感染模型的定義與分類(lèi)

1. 定義

燙傷感染模型是一種復(fù)合型動(dòng)物模型，通過(guò)人為制造燙傷創(chuàng)面并接種病原菌，模擬臨床燙傷后創(chuàng)面感染的病理過(guò)程。其核心目標(biāo)是研究感染機(jī)制、評(píng)估抗感染藥物及創(chuàng)面愈合策略。

• 燙傷基礎(chǔ)定義：由無(wú)火焰高溫液體（沸水、熱油）、固體（熱金屬）或蒸汽導(dǎo)致的組織損傷，破壞皮膚屏障功能，增加病原體定植風(fēng)險(xiǎn)。

2. 分類(lèi)依據(jù)

根據(jù)感染發(fā)生方式分為兩類(lèi)：

• 自發(fā)感染模型：燙傷后不主動(dòng)接種病原菌，依賴(lài)環(huán)境微生物自然定植，模擬臨床繼發(fā)感染。

• 外源性感染模型：燙傷后立即接種特定病原菌（如金黃色pu萄球菌、銅綠假單胞菌），可控性強(qiáng)，用于機(jī)制研究。

燙傷深度分級(jí)（基于組織損傷程度）：

二、動(dòng)物模型選擇與構(gòu)建方法

1. 常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及特點(diǎn)

2. 模型構(gòu)建的核心步驟

（1）燙傷創(chuàng)面制備

• 方法選擇：

• 熱水燙傷法：動(dòng)物脫毛麻醉后，背部浸入恒溫水浴（溫度/時(shí)間因動(dòng)物而異）：

• 大鼠：92℃水浸18秒 → Ⅲ度燙傷；100℃砝碼壓5秒 → 淺Ⅱ度。

• 小鼠：80℃水浸20秒 → Ⅲ度；55℃水浸20秒 → Ⅱ度。

• 熱金屬接觸法：銅塊/電烙鐵預(yù)加熱至80–100℃，垂直按壓皮膚（時(shí)間控制深度）。

• 深度驗(yàn)證：48小時(shí)后組織學(xué)檢查（HE染色），確認(rèn)真皮壞死程度。

（2）病原菌接種

• 菌種選擇：臨床常見(jiàn)病原體如金黃色pu萄球菌（ATCC 25923）、銅綠假單胞菌。

• 接種方法：

• 刮擦法：創(chuàng)面輕微刮擦后滴注菌液（20μl，濃度1×10?–1×10? CFU/mL）。

• 直接涂布：均勻涂布菌液于創(chuàng)面（大鼠：1ml菌液）。

• 優(yōu)化濃度：小鼠模型驗(yàn)證顯示1×10? CFU/mL為最佳感染濃度（顯著延遲愈合，P<0.01）。

（3）感染維持與監(jiān)控

• 單籠飼養(yǎng)避免交叉感染，自由飲水飲食。

• 定期檢測(cè)痂下細(xì)菌載量（>1×10? CFU/g組織提示感染成立）。

三、模型評(píng)估指標(biāo)

1. 感染特異性指標(biāo)

• 細(xì)菌載量：

• 痂下組織定量培養(yǎng)（CFU/g）。

• 內(nèi)臟（肝、腎、肺）細(xì)菌定植評(píng)估全身播散。

• 炎癥反應(yīng)：

• 局部：HE染色觀察中性粒細(xì)胞/單核細(xì)胞浸潤(rùn)；ELISA檢測(cè)創(chuàng)面促炎因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）↑ 和抗炎因子（IL-10）↓。

• 全身：血清HMGB-1（損傷相關(guān)分子）、透明質(zhì)酸↑，纖維連接蛋白↓。

2. 創(chuàng)面愈合指標(biāo)

• 愈合時(shí)間：感染組愈合時(shí)間顯著延長(zhǎng)（小鼠：15.92±0.34天 → 21±0.95天）。

• 組織病理學(xué)：

• 光鏡觀察上皮再生、膠原排列、肉芽形成。

• IHC染色檢測(cè)凋亡標(biāo)志物（如cC3上調(diào)）。

3. 全身并發(fā)癥指標(biāo)

• 死亡率：感染組5天存活率降至40%（對(duì)照組100%）。

• 血常規(guī)：白細(xì)胞總數(shù)↑（尤其粒細(xì)胞/單核細(xì)胞）。